​飲用水中大腸桿菌檢測方法是什麼

大腸桿菌是比較常見的細菌， 對於人體是有害的， 常見於我們的飲用水當中， 要是長時間的飲用含有大腸桿菌的水的話， 對於身體的傷害是很大的。 對此， 要檢查水中的大腸桿菌。 那飲用水中大腸桿菌檢測方法是什麼?這個問題， 很多的朋友都很好奇， 下面就為大家簡單的介紹一下。

飲用水中大腸桿菌檢測方法是什麼?

1、飲用水中大腸桿菌快速檢測方法， 其特徵在於包括以下步驟：

(1)水樣中微生物的收集及其DNA的提取： 採用滅菌後的濾膜或濾器過濾水樣， 在裝有無菌水的EP管中， 洗滌濾膜， 離心， 棄上清液， 備用;

(2)水樣中微生物DNA的提取： A、向EP管中加入TE緩衝液， 使之重懸; B、加入SDS和蛋白酶K， 混勻， 溫育45min～1h; C、加入氯仿/異戊醇， 混勻， 離心， 將上清液轉入一個新EP管中; D、加入等體積的酚/氯仿/異戊醇， 混勻， 離心， 將上清液轉入一個新EP管中; E、加入異丙醇， 輕輕混合直到DNA沉澱下來， 離心; F、棄上清，

沉澱物用乙醇洗滌， 晾乾; G、將沉澱重溶於TE緩衝液， 搖勻; H、用紫外分光光度計測定提取的基因組DNA範本的0D值， 計算其DNA濃度， 計算方 法為： DNA濃度(μg/μL)=OD值260nm×樣品稀釋倍數×50/1000 I、將基因組DNA範本做好標記， 貯存， 備用;

(3)PCR擴增; 反應引物： 上游引物：5’-tgttcagtggcaagagtt-3’ 下游引物：5’-taatcgatatacccgctc-3’ 50μL反應體系： 10×PCR緩衝液5μL Tag酶2U/μL1μL MgCl2(25mM)5μL dNTP(2.5MM)5μL ddH2029μL 上游引物10μM2μL 上游引物10μM2μL 範本DNA1.5μg/μL1μL

(4)產物觀察： A、凝膠的準備：先配置瓊脂糖溶液， 加熱， 使其充分溶解， 再加入溴化乙錠溶液; B、配置TAE電泳液; C、倒膠：將配置好的瓊脂糖溶液倒入膠板中， 待其凝固後， 放入電泳槽中; D、電泳：將擴增好的PCR產物與緩衝液按比例混合， 加入到凝膠加樣孔中， 同時加入 DNA分子量標準， 接通電源， 設定電壓和電流， 開始電泳。 E、觀察;將擴增產物在紫外光下觀察， 拍攝圖片。

上文就是關於飲用水中大腸桿菌檢測方法是什麼的介紹，

現在大家瞭解了吧!其實可要我們不喝生水， 飲用經過燒開的水， 就沒有這些問題了。 這就是為什麼總是提倡大家和涼開水的原因。 而且多喝涼開水對身體是很有好處的， 無論是男女老少。