硝酸纖維素的使用技巧是什麼？
硝酸纖維素是一種白色的聚合物， 這種物質其實有很多稱呼， 比如又被人們稱為纖維素硝酸脂， 其英文簡稱是nc， 這種化學物質有很多特點， 比如被陽光照射之後容易變色， 還具有容易燃燒的特點， 所以其實硝酸纖維素是一種危險品， 平時使用的時候一定要謹慎， 下面為大家介紹硝酸纖維素的正確使用方法。
硝酸纖維素膜的應用技巧：
1.蛋白與膜的結合原理
蛋白與膜的結合原理， 已知的結合力包括疏水作用力H鍵靜電作用力等， 確切的結合原理並不明確， 主要靠假說來支撐.主要有兩種假說：
1)首先兩者靠靜電作阻力結合， 然後靠H鍵和疏水作用來維持長時間結合.
2)首先兩者靠疏水作用結合， 然後靠靜電作用來維持長時間結合.
兩條假說， 都表明其結合過程分為兩步， 首先結合和後面長時間結合.由於結合原理的不明確性， 導致在這方面的工作非常依賴實踐經驗.
2.膜對結合的影響
1)膜孔徑
有些技術人員傾向使用膜孔徑來區分不同的膜， 但是請注意這只僅僅限於同一廠家的產品， 如果是不同廠家的產品， 這種比較是無意義的.膜孔徑與層析速度的關係， 已在上文描述.
隨著膜孔徑減小，
另外， 膜孔徑越小， 層析速度也越小， 那麼金標複合物通過T線的時間也就越長， 反應也就越充分.
綜合以上兩點， 結論為膜孔徑越小靈敏度越高.但是同時也減慢了跑板速度， 增加了非特異性結合的機會， 也就是假陽性越高.所以要按照試驗結果挑選適合實際專案的膜， 找到合適的平衡點.
2)不同廠家的膜差異
這個差異主要來源於兩點：
1>生產膜時， 使用的聚合物和表面活性劑的來源， 類型， 數量不同.同理， 在膜處理中這兩類物質一般會對性能產生較大影響.
2>處理過程不同.
3.生物原料， 緩衝溶液的試劑和配方
1)生物原料， 作為CT線的生物原料使用情況各異， 所以這裡只做略述.
首先， 單克隆抗體與膜的結合優於多克隆抗體， 主要時由於多克隆抗體有很多不同的表面位點， 而各位點與膜的最佳結合條件都有細微的差別， 毫無疑問就增加了優化難度.
其次， 分子量越大， 蛋白越難結合到固相材料上.
2)緩衝液
大家最關心的可能就是希望獲得一個性能優良的配方， 包括緩衝液， 封閉液等等處理溶液配方.
其實也無法提供給一個萬用配方清單.因為不同的反應體系需要不同的配方來支援， 而不同機構的反應體系又有差異.想獲”魚”先學”漁”.為了不誤導大家， 在下面涉及到配方的問題上， 僅提供思路， 具體配方請自己摸索.
緩衝液的構成一般是：PBS(或其他緩衝體系)+作用物質(針對某一特定問題)+PH調整.在參考過以前的各種資料後， 個人意見為配方原則為宜簡不宜繁， 根據自己的需要添加作用物質， 原來的很多需要添加的作用物質， 由於膜製造技術的改進已經不再需要.
推薦的緩衝體系為0.01MPBSPH7-7.2， 該緩衝體系對多種抗原抗體都有良好的適應性.
作用物質的情況大致羅列如下：
少量NACL， 減少信號強度， 消假陽.
有機醇(甲醇， 異丙醇等)， 潤濕膜， 減少膜帶有的靜電， 利於結合包被.個人不推薦， 因制膜工藝改進.
表面活動劑(TW20， TX100)， 增加親水力， 可避免線條中空現象， 也可增色.
糖， 保護劑， 減緩老化速度， 也可以增加親水力同上.
調PH到某個位置， 可以消假陽.
4.點樣環境
環境濕度對點膜過程非常重要.最佳濕度一般在45-65%.
濕度過低， 膜上容易聚集靜電荷， 點膜容易出現散點， 導致測試會出現疏水斑.
濕度過高， 膜上毛細作用加強， 點膜容易引起CT線變寬甚至擴散.
為了保證點樣時膜濕度的均一性， 一般在點樣前把膜放到該濕度條件下平衡一段時間.
5.點樣儀器與膜面情況的關係
目前有兩種點樣方式，劃膜式和非接觸點膜式.非接觸點膜式優於劃膜式，進口劃膜式優於國產劃膜式.
因劃膜式為軟管將抗體劃到膜表面，而膜本身的物理性質為軟脆，劃管會在其表面留下印痕.進口的劃膜機由於使用的材料和控制系統較好，所以留下的劃痕較輕，而國產儀器較差，留下的劃痕也就比較嚴重.劃痕容易對層析的金標複合物形成阻力，導致假陽性.同時容易出現跑板時在T線位置出現若有若無一條細線(鬼線)，而跑板結束後鬼線消失的奇怪現象.
6.膜的寬度與點樣位置
膜的寬度一般有18mm(or20mm)和25mm兩種，分別使用在做測試條和做測試板上.
然而，不同的T線點樣位置將帶來不同的靈敏度.點樣位置上移，金標複合物通過T線位置時速度變慢，反應時間增加，靈敏度升高.反之靈敏度降低.這個方法可以用來改變靈敏度和消除假陽性。
5.點樣儀器與膜面情況的關係
目前有兩種點樣方式，劃膜式和非接觸點膜式.非接觸點膜式優於劃膜式，進口劃膜式優於國產劃膜式.
因劃膜式為軟管將抗體劃到膜表面，而膜本身的物理性質為軟脆，劃管會在其表面留下印痕.進口的劃膜機由於使用的材料和控制系統較好，所以留下的劃痕較輕，而國產儀器較差，留下的劃痕也就比較嚴重.劃痕容易對層析的金標複合物形成阻力，導致假陽性.同時容易出現跑板時在T線位置出現若有若無一條細線(鬼線)，而跑板結束後鬼線消失的奇怪現象.
6.膜的寬度與點樣位置
膜的寬度一般有18mm(or20mm)和25mm兩種，分別使用在做測試條和做測試板上.
然而，不同的T線點樣位置將帶來不同的靈敏度.點樣位置上移，金標複合物通過T線位置時速度變慢，反應時間增加，靈敏度升高.反之靈敏度降低.這個方法可以用來改變靈敏度和消除假陽性。
