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pcr檢測應用在哪些方面

分子生物學在目前醫學研究領域算是前沿科技, 而44pcr檢測技術是其中之一, 在臨床醫學應用比較廣泛。 44pcr檢測技術主要用於對基因序列的分析, 檢測腫瘤、癌細胞和遺傳病等發生過程。 它的特點是在短時間之內可以檢測到突變的基因, 對於複雜的基因組織也有跡可循, 而且易於和其它基因檢測手段結合使用, 所以在醫學研究應用領域受到廣泛應用。

PCR在在突變檢測基因的應用:

一、點突變的PCR直接檢出

(一)用PCR直接檢測缺失:

當基因內缺失時, 可用已知的該基因DNA序列在缺失片段的兩側設計一對引物, 然後進行PCR, 對其產物行瓊糖凝膠電泳, 溴乙錠染色, 紫外檢測儀下檢測有無特異 性的擴增產物, 即可非常容易的判斷待檢稱本中有無DNA片段的缺失。

1. 一對引物PCR檢測缺失如果一個基因的DNA序列已經清楚, 其缺失部位亦較為固定, 即可根據缺失發生區域的DNA序列在缺失片段的兩側合成一對合適的引物進行PCR,

然後瓊脂糖凝膠電泳及溴乙錠染色, 短波紫外燈下觀察有無特異性的擴增片段, 該方法是檢測基因片段缺失最為快速的方法。

2. 多對引物的多重PCR檢測缺失。

3. 用PCR技術進行雜合性丟失的檢測。

(二)單個堿量置換的PCR直接檢出

1. 直接檢測限制性內切酶切點的變化-PCR產物酶解分析 。

2. 3'特異PCR, 擴增阻滯突變系統及等位元特異PCR。

3. 3.PCR直接測序。

4. PCR-寡核苷酸探針斑點雜交(PCR-ASb)。

二、用PCR技術快速篩查突變基因

前邊所述及的方法均可直接檢出突變部位, 而其前提則是突變的性質和部位必須清楚,

但在許多情況下, 基因突變的位點不固定, 而且性質亦不是非常清楚, 因此就需要用一些快速簡便的篩查方法以確定檢材中有無基因突變, 近年來, 以PCR技術為基礎建立起來的突變快速篩查技術已普遍應用於腫癌及遺傳病基因突變的檢測。

(一)PCR-單鏈構象多態性

(二)變性梯度膠(DGGE), 恒定變性膠(CGGE)及溫度(TGGE)檢測基因突變。

總之, 以PCR技術為基礎建立的基因突變檢測技術有多種, 而且各有其優缺點, 但目前較為廣泛應用的為PCR-SSCP, PCR-ASO及PCR迴圈直接測序, 隨著新方法的不斷出現, 將會大大的促進基因突變的研究。