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使蛋白質沉澱的常用方法有哪些?

問題描述 使蛋白質沉澱的常用方法有哪些?
網友回答
2000年01月01日 00:00

分離提純某一種蛋白質時,首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來並保持原來的天然狀態,不喪失活性。所以要採用適當的方法將組織和細胞破碎。1.等電點沉澱法不同蛋白質的等電點不同,可用等電點沉澱法使它們相互分離。2.鹽析法不同蛋白質鹽析所需要的鹽飽和度不同,所以可通過調節鹽濃度將目的蛋白沉澱析出。被鹽析沉澱下來的蛋白質仍保持其天然性質,並能再度溶解而不變性。3.有機溶劑沉澱法中性有機溶劑如乙醇、丙酮,它們的介電常數比水低。能使大多數球狀蛋白質在水溶液中的溶解度降低,進而從溶液中沉澱出來,因此可用來沉澱蛋白質。此外,有機溶劑會破壞蛋白質表面的水化層,促使蛋白質分子變得不穩定而析出。由於有機溶劑會使蛋白質變性,使用該法時,要注意在低溫下操作,選擇合適的有機溶劑濃度。

2000年01月01日 00:00

您好。一般最常見的是鹽析沉澱,就是在蛋白質溶液中加入一定量的硫酸銨,蛋白質便會沉澱下來,不同蛋白沉澱所需要的硫酸銨濃度不一樣,再有就是等電沉澱,通過調節蛋白溶液的pH,使其剛好達到目標蛋白的等電點,這時候蛋白分子將不帶有電荷,在相互碰撞聚集過程中沉澱下來.與之類似的有通過加沉澱劑或絮凝劑比如明礬之類的,也可以沉澱蛋白.另外還有就是親和沉澱,利用生物分子親和力,比如抗原抗體親和、酶與底物親和等性質,將配對的另一半固定在某些介質,比如小磁珠上,就能將溶液裡面的目的蛋白抓住沉澱下來.

2000年01月01日 00:00

你好!蛋白質沉澱是通過降低蛋白質的溶解度達到分離蛋白質目的的方法,常見的有鹽析、有機溶劑沉澱法,等電點沉澱等。

2000年01月01日 00:00

鹽析法和有機溶劑沉澱法,通過破壞蛋白質的水化膜而使蛋白質沉澱,此方法在常溫下可使蛋白質變性,低溫下可使變性速度減慢